Проблемы здоровья и экологии

Выводы

Применение технологии QCM на векторе рККAdx, ответственного за эндоплазматическую экспрессию белка, и смеси детергентов при лизисе бактериальных клеток позволили получить гомогенный препарат рекомбинантного His-Tag фьюжен адренодоксин с высоким выходом. Анализ ферментативной активности выделенного адренодоксина с His-Tag на С-конце и способности его к белок-белковому взаимодействию с адренодоксин редуктазой и цитохромом P-450 scc показал, что выделенный препарат не уступает по этим параметрам рекомбинантному белку, полученному традиционным методом, и может успешно использоваться для биосинтеза препаратов стероидных гормонов.

Заключение

Использование технологии QCM является высокоэффективным методом направленного «кассетного» мутагенеза, который позволяет за одну стадию модифицировать ген, не изолируя его из оригинального вектора. Для получения рекомбинантных белков, отличающихся высокой чувствительностью к протеолитическому расщеплению, следует использовать векторы, обеспечивающие секрецию вновь синтезируемого полипептида в периплазматическое пространство бактерии. Применение различных видов Tag, имеющих аффинность к специфическим матрицам, и смеси детергентов в процессе лизиса бактериальных клеток значительно сокращает время очистки белка и повышает его выход.

ЛИТЕРАТУРА

1. Uhlmann H., Beckert V., Schwarz D. and Bernhardt R. Expression of bovine adrenodoxin in E. coli and site-directed mutagenesis of [2Fe-2S] cluster ligands, Biochem. Biophys // Res. Commun. — 1992. — Vol. 188. — P. 1131–1138.

2. Wang W. and Malcolm B.A. Two-Stage PCR protocol allowing introduction of multiple mutations, deletions and insertions using QuikChange Site-Direction Mutagenesis // BioTechniques. — 1999. — Vol. 26. — № 4. — Р. 680–682.

Поступила 02.12.2005

Правила для авторов

Редакция журнала «Проблемы здоровья и экологии» просит авторов соблюдать следующие правила:

Статьи должны быть написаны на высоком научном и методическом уровне с учетом требований международных номенклатур, отражать актуальные проблемы, содержать новую научную информацию, рекомендации практического характера. При изложении методик исследований необходимо сообщать о соблюдении правил проведения работ с использованием экспериментальных животных.
Статья должна быть напечатана на одной стороне листа с двойным интервалом между строками в 2-х экземплярах. Ширина поля слева  3 см, сверху и снизу  2,5 см, справа  1 см. Текстовый редактор  microsoft word 97 и выше. Шрифт  times new roman, 12.
Объем оригинальных статей, включая рисунки, таблицы, указатель литературы, не должен превышать 10 страниц, научных обзоров и лекций  15 страниц, остальных материалов — 6 страниц.
Вначале пишутся удк, название статьи, инициалы и фамилия авторов, ученое звание и степень, учреждение, которое представило статью.
Перед текстом статьи печатается реферат и ключевые слова на русском языке, затем название статьи, фамилии авторов, название учреждения (полное), название статьи, реферат и ключевые слова на английском языке (не более 10 машинописных строк).
Текст статьи печатается с обязательным выделением следующих разделов: введение, материалы и методы, результаты и обсуждение, выводы, заключение, список использованной литературы.
Сокращение слов не допускается, кроме общепринятых сокращений химических и математических величин, мер, терминов. В статьях должна быть использована система единиц си.
В таблицах, графиках и диаграммах все цифры и проценты должны быть тщательно выверены автором и соответствовать цифрам в тексте. В тексте необходимо указать их место и порядковый номер. Все таблицы, графики и диаграммы должны иметь названия.
Обязательна статистическая обработка данных с применением современных методов.
Количество графического материала должно быть минимальным. Иллюстрации (фотографии, графики, рисунки, схемы) должны быть обозначены как рисунки и пронумерованы последовательно арабскими цифрами. К публикации в журнале принимаются статьи, иллюстрированные черно-белыми (с градациями серого цвета) рисунками высокого качества. Фотографии, фотокопии с рентгенограмм  в позитивном изображении должны подаваться в электронном виде, записанными в одном из форматов, предпочтительно  tiff, jpg, psd. В подписях к микрофотографиям указываются увеличение (окуляр, объектив) и метод окраски или импрегнации материала.
В конце каждой оригинальной, обзорной статьи и лекции должен быть приложен библиографический указатель работ (не более 15), использованных автором, в алфавитном порядке. Следует указать номер по порядку, фамилию автора, его инициалы, полное название статьи, полное название книги или название журнала, место и год издания, том, номер, страницы. Сначала приводятся отечественные работы, а затем иностранные. В тексте дается ссылка на порядковый номер списка в квадратных скобках. Статьи без литературных ссылок не принимаются. Ссылки на авторефераты диссертаций не допускаются.
К статье прилагаются сведения об авторах (ф.и.о., звание, ученая степень, должность, учреждение, город, адрес электронной почты и контактный телефон).
Статья должна быть изложена на русском или английском языке для иностранных авторов.
В конце статьи должны быть подписи всех авторов.
Обязательно предоставление материалов на магнитных носителях с соблюдением вышеуказанных правил. Надпись на дискете должна содержать ф.и.о. автора и название статьи.
Направление в редакцию ранее опубликованных или уже принятых в печать в других изданиях работ не допускается.
Статья должна быть тщательно отредактирована и выверена автором. Обязательна виза руководителя подразделения.
Статьи рецензируются членами редколлегии и редакционного совета.
Редакция оставляет за собой право сокращать и редактировать статьи.
При нарушении указанных правил статьи не рассматриваются.
Рукописи не возвращаются.